Judith Margolin a suivi sa formation théâtrale à Paris avec Philippe Brigaud au Studio 34 et Raymond Aquaviva au Sudden Théâtre. Elle pratique également la danse et le chant.

Elle a joué de nombreux auteurs classiques : Shakespeare, Ionesco, Marivaux, Courteline. Elle a aussi créé un cabaret, Frous-Frous, pour les hôpitaux et les Samu sociaux.

Elle travaille actuellement A Tous Ceux Qui, de Noëlle Renaude, une pièce contemporaine qui a obtenu le prix Paris Jeunes Talents 2006.

Elle a tourné pour France 2, notamment dans Le Bal des Célibataires de Jean-Louis Lorenzi.